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如何解决细胞培养瓶细胞成团问题有哪几种方式

点击次数:174 发布时间:2022-03-28
  细胞培养瓶主要用于简化大规模细胞培养的过程,培养瓶的设计能够简化您的工作流程,减少工作步骤以及降低污染风险。可以使用移液管移去、补充培养基并且收获细胞,设计有混合区可实现在容器内的液体混合,因此可以将细胞悬液、转染或者其他试剂直接加入到培养瓶中进行混合。同时,混合区可确保培养基和细胞在各层的均匀分布,从而保证细胞生长的均匀一致。
 
  细胞培养瓶中平均分布的培养基、Nunclon表面处理技术和有效的气体交换共同为细胞提供了一个最佳的培养环境,从而为细胞的高产量和细胞同源性提供保障。在细胞培养中,细胞成活率和活性都有显著提高。培养瓶装液体积比例提高,单位体积表达量的增加??梢源罅拷谑∨嘌亢团嘌南?,具有高重复性,不同批可扩展性次细胞生长以及产量具有很高的一致性。
 
  首先,细胞成团并不一定都会影响细胞培养进程。如果细胞轮廓清晰胞体通透,呈串状均匀聚集,证明细胞的生长状态良好。但多数情况下,聚团的细胞都是轮廓模糊、透光性差,甚至会出现合胞体,伴有细胞碎片,这证明细胞已经衰老或产生病变,状态不佳。解决细胞成团问题可以通过以下几种方式:
 
  1、如果细胞抱团不影响生长就没问题,只是计数时较麻烦。在消化时,可在细胞由多角形变成圆型之前,用手轻磕细胞培养瓶的侧壁,使细胞从壁上脱落(最好不要吹打,对细胞形状和生长都不好)。
 
  2、如果感觉有死细胞的DNA,在细胞悬液中加入几滴无菌的DNAse(1mg/ml溶于水)将DNA链打断。轻柔地吹打细胞,防止对细胞膜造成物理损伤。
 
  3、如果细胞抱团是肉眼可见的,可让细胞静置半分钟左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,目前还没有特别好的分离方法,只能等细胞状态改善后将这部分细胞慢慢排除出去。
 
  细胞培养瓶内的细胞出现抱团现象,可以按照以上方法进行处理,在细胞培养过程中需要及时观察细胞的生长状态,并针对所出现的情况做出相应的调整。
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